Tout d’abord, dans la matinée, nous avons dénombré les colonies de chaque boîtes de Petri. On a alors calculé le nombre de colonie par boîte ainsi que leur densité et regroupé dans un tableau.
En ce qui concerne l’après-midi, nous avons réalisé 4 expériences différentes pour les 6 échantillons, c’est-à -dire:
-Terre forêt
-Terre ( de Mylis)
-Terre ( de Tuana)
-Plastique forêt
-Amidon forêt
-Plastique lycée
Pour la première expériences, dans une boîte de Petri divisée en 2 à chaque fois et dans chacune des parties sont numérotés des points de 1 à 20, il a fallut déposer 20 colonies différentes à chaque point avec un cure-dent différent. Et ainsi répéter la manipulation pour chaque échantillon. Ce test a permis de voir si la bactérie produit des antibiotiques ce qui sera analyser plus tard.
A la deuxième expérience, dans des boîtes de Petri à nouveau, nous avons ensemencé 100µL de solution d’échantillon du jour précédent. Puis on y a ajouté à six endroits distinct de la boîte, des antibiotiques soient: Amoxicilin, Gentamicin, Aztreonam, Streptomycin, Erythromycin ainsi que Ciprofloxacin. Pour finir il a fallut les incuber à 30°C. Ce test permet de faire une identification antibiogramme.
Comme troisième étape, nous avons introduit 4 mL de chaque échantillon dans deux plaque à six puits pour pouvoir en remplir 8. Dans chaque puits il y a eut:
-l’échantillon seul pour le témoin
-l’échantillon et les 20 billes plastique
-l’échantillon et 0,1µg/mL de cuivre
-l’échantillon et 0,01µg/mL d’antibiotique
-l’échantillon, les 20 billes plastique et 0,1µg/mL de cuivre
-l’échantillon, les 20 billes plastique et 0,01µg/mL d’antibiotique
-l’échantillon, 0,1µg/mL de cuivre et 0,01µg/mL d’antibiotique
-l’échantillon, les 20 billes plastique, 0,1µg/mL de cuivre et 0,01µg/mL d’antibiotique
Ce test permet de déterminer l’antibiorésistance en combinant les polluants.
Pour finir, comme 4ème expériences, nous avons pris un plaque pour les 4 groupes et introduit 4mL de M9, 40µL de chaque échantillons dans chaque compartiments pour chaque groupes et 10 billes de plastique.
Ce test permet d’analyser la sélection des µ-organismes dégradant le plastique.
